熒光標(biāo)記時(shí)，肽和修飾標(biāo)記的染料之間需要加一個(gè)間隔嗎？
多數(shù)染料屬于大分子量芳香族氨基酸，在多肽中引入這一類大型分子，為了避免多肽與標(biāo)簽之間發(fā)生相互作用，維持蛋白的構(gòu)象及其生物學(xué)活性，我們推薦引入一個(gè)可彎曲的間隔區(qū)，比如Ahx, Ahx是一個(gè)含有6碳分子的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，可以維持熒光標(biāo)簽的穩(wěn)定性。否則，F(xiàn)ITC很容易結(jié)合多肽序列中的半胱氨酸殘基或者賴氨酸殘基。
通常情況下，生物素、FITC一類的染料既可以標(biāo)記在蛋白的氨基端也可以標(biāo)記在蛋白的羧基端。然而，為了在*短時(shí)間內(nèi)，*便捷又高效地合成多肽，***推薦客戶選擇標(biāo)記在氨基端。因?yàn)橐粋€(gè)多肽的合成往往是從羧基端開(kāi)始的，這樣一來(lái)，氨基端的修飾便成為*后一個(gè)環(huán)節(jié)，不需要再進(jìn)行特別的結(jié)合作用。反之，羧基端修飾需要額外的環(huán)節(jié)，因此過(guò)程更加復(fù)雜。