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請(qǐng)介紹一下你們的純化策略
我公司合成的多肽是用制備型反相HPLC進(jìn)行純化的，所用的兩種流動(dòng)相中都添加了TFA，pH 2。A相是0.1% TFA于超純水中，B相是0.1% TFA 于ACN 中，pH 2。樣品可以直接用A相溶，或者先用少量B相溶解再用A相稀釋。有時(shí)可能需要用強(qiáng)溶劑如甲酸、乙酸來(lái)溶解疏水肽，具體采用哪種方法要看肽序列。在pH 6.8 時(shí)一般很難將肽溶解也很難進(jìn)行純化，因此我們一般是先將肽溶解再用兩種流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫。所用的pH 6.8的緩沖液為10 mM醋酸銨于超純水中（流動(dòng)相A），純ACN（流動(dòng)相B）。通過(guò)紫外檢測(cè)器在214 nm處檢測(cè)，收集不同組分并用MADLI-TOF MS進(jìn)行成分鑒定，用反相 HPLC分析純度，然后把目的肽凍干，將凍干的肽合并裝入小瓶中，*后，再對(duì)合并后的產(chǎn)物進(jìn)行MS和HPLC分析。
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