多肽含量分析

多肽產(chǎn)品中除了多肽本身還包括生產(chǎn)過程中帶入的水份及有機(jī)鹽分等雜質(zhì)，多肽純度僅指多肽本身所含肽產(chǎn)品的

含量及雜質(zhì)的含量，不包括水份等雜質(zhì);而多肽含量則是指目標(biāo)多肽在產(chǎn)品中的凈含量，般以N元素分析或氨基酸

分子的方法來檢測(cè);因此條多肽即使純度達(dá)到99%，因?yàn)楫a(chǎn)品中還包含水份及有機(jī)鹽分等，它的含量可能也只有

70-80%。

轉(zhuǎn)鹽/脫鹽

固相多肽合成多數(shù)多肽在TFA體系下分離純化的，所以多肽以TFA鹽的形式較多，其次藥物肽一般有醋酸鹽及鹽酸

鹽的形式，極少數(shù)藥物肽會(huì)有一些特殊的鹽形式。轉(zhuǎn)鹽有兩種情況：一種是過柱直接交換離子達(dá)到轉(zhuǎn)鹽目的，一種

是多肽掛柱，經(jīng)過相關(guān)鹽溶液過柱轉(zhuǎn)鹽后再使用相應(yīng)溶媒將多肽洗滌下來已達(dá)到轉(zhuǎn)鹽的目的。而脫鹽可用透析袋和

超濾膜。

溶解度測(cè)試

一般來說，先將粉末用超純水或者稀醋酸（0.1%）將多肽溶解到一個(gè)超高濃度下作為儲(chǔ)存溶液，而不是直接配置到

檢測(cè)濃度。如果多肽溶解過程中出現(xiàn)可見顆粒始終無(wú)法分散到水相中，可以用超聲的助溶，但不能起到改善溶解性

的效果。

其次，如果多肽中氨基酸（Ala,Phe,Ile,Leu,Met,Pro,Val,Trp,Tyr,Cys）占比高，基本上這條肽比較難溶的。另外還

要計(jì)算序列中含有多少正價(jià)基團(tuán)（Lys,Arg,His和N端）和負(fù)價(jià)基團(tuán)（Asp,Glu和C端），在中性條件下，凈價(jià)是正是

負(fù)？價(jià)態(tài)為正，在溶解時(shí)用稀醋酸調(diào)節(jié)pH到酸性，價(jià)態(tài)為負(fù)，溶解時(shí)可以用稀氨水調(diào)節(jié)pH到堿性。

如果序列中任何pH下基本不帶電荷，或者序列中疏水性氨基酸個(gè)數(shù)超過50%，可以考慮加入少量乙腈，乙醇，DMSO

來溶解。如果已知一條肽在水相中溶解不是很好，但必須使用在水相，可以考慮全部使用醋酸或者DMF,DMSO溶解，

然后緩慢加水稀釋，這樣有機(jī)溶劑有助于多肽分散到水相中。

合生生物溶解度測(cè)試服務(wù)可以幫助客戶相應(yīng)面對(duì)疏水性氨基酸的溶解，可以提供完整的多肽溶解報(bào)告。為客戶節(jié)約樣

品，節(jié)省時(shí)間和經(jīng)費(fèi)。

內(nèi)毒素控制工藝

細(xì)菌內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁成分，當(dāng)細(xì)菌死亡或自溶后便會(huì)釋放出內(nèi)毒素。具有強(qiáng)大的生物活性，可激活免

疫系統(tǒng)，導(dǎo)致多種介質(zhì)釋放，如腫瘤壞死因子、多種白細(xì)胞介素、自由基等，產(chǎn)生**反應(yīng)。在體外細(xì)胞培養(yǎng)過程中，

高內(nèi)毒素水平影響細(xì)胞活力及轉(zhuǎn)染效率。常規(guī)多肽工藝中有引入內(nèi)毒素風(fēng)險(xiǎn)，為了減少內(nèi)毒素多體內(nèi)實(shí)驗(yàn)或者細(xì)胞實(shí)

驗(yàn)的影響，合生生物提供內(nèi)毒素控制服務(wù)，優(yōu)化生產(chǎn)工藝，環(huán)境。保證內(nèi)毒素控制10eu/mg甚至更低，并且提供內(nèi)毒

素報(bào)告。

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